Q1：如何复苏hMSCs细胞？
A1：1)37℃水浴快速复苏冻融细胞。
2)将细胞转移到50ml离心管中。
3)逐滴向装有1ml细胞液的离心管中加入10ml预先复温的MSC培养基，注意边加边轻轻晃动离心管。
4) 将上述混合溶液转移到细胞培养瓶或细胞培养板中。或者可250g （约1200rpm）离心10min，再用MSC培养基重悬后再转移到细胞培养板中。
5)6%CO2，36‐38℃培养箱孵化。
6)孵化24h，换液。
7)此后每隔2天换液，直到传代培养。
Q2：培养的MSCs生长到什么时候传代最好？
A2：在镜下观察（使用ExCell MSC无血清培养基或其它培养基）细胞，确定传代的最佳时间。为了保证MSCs的生长潜力，推荐在细胞量达到70% 满的时候传代。如果细胞量达到80% 以上满时，细胞在传代之后可能出现停止增殖的现象。
切记，在任何情况下，不要让细胞超过80%满!
Q3：怎样从其它培养基向ExCell MSC过度？
A3：培养于其它无血清或有血清培养基的间充质干细胞可以快捷方便地转换到ExCell MSC培养基中培养。多数情况下，直接转换到ExCell MSC培养基中便可。个别情况下，可能需要逐步转换到ExCel MSC培养基 (如20%，40%，依次递增)。
Q4：使用ExCell MSC培养基时应怎样配制？
A4：1)解冻MSC添加物。建议过夜2‐8℃解冻。解冻后的溶液可以分装，于‐80℃保存，尽量避免反复冻融。
2)配制100ml MSC培养基，需在无菌条件下添加10ml MSC添加物于90ml MSC基础培养基中，再加入1ml 200mM L‐谷氨酸盐或GlutaMAX (GIBCO),。
3)如果需要也可加入抗菌素（自选）。
配制好的MSC完全培养液（包含基础液、添加物、谷氨酸盐）2‐8°C避光保存，保存期为1个月。
