Q1：结果出现白板？
A1：请检查包被板，标准品，生物素抗体是否用错。
Q2：如何处理组织样本，进行ELISA方法检测？
A2：一般是检测组织匀浆，各实验室可根据实际情况选择合适的匀浆方法。组织匀浆制备的原则如下：
1）基质选择：中性(pH7.0-7.2),等渗
2）制备方法：低温匀浆或超声破碎
3）离心选择：4℃,10000rpm，10~15分钟，取上清。
4）)储存条件：上清液分装，－80℃保存，避免反复冻融。
Q3：ELISA检测时，结果出现负值该怎么办呢？
A3：1）血清中有些细胞因子的检出率很低，血清中又含有很多大分子杂蛋白，在血清浓度较高时容易遮盖抗原的表位，因此在测血清原液时常出现负值。这就是在我们的说明书中建议检测血清时做1:2稀释的原因。除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀释外，其它一些细胞因子都要做1:2稀释（这在我们的说明书中有提示）。做法是：先在样本孔中加50ul试剂稀释液（试剂盒中已备），再加50ul样本。求出样本含量后需要乘上稀释倍数2。
2）如果按上诉方法处理后检测仍有负值，则处理数据时可以采取2个方法：
a：标准曲线只取标准曲线的下面4~5个点，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。原则是把样本的OD值全包括，标准曲线又能至少有4个点。也就是把标准曲线的下端（即样本含量集中的这一段）放大，求出的数据更可靠。
b：人为的把“0”pg/ml点OD值降低。原则是把“0”OD值降到比最低的样本OD略低一点，尽可能使样本的含量全是正值，同时保证变化“0”OD值后的标准曲线的相关系数（r）＞0.98。这样变化后，一般样本都能得到数据，低的样本出来了，高的样本含量也会高一些。因为统计时是相对含量的比较，所以不会影响统计结果。
Q4：“0”孔与空白孔是一样的吗？
A4：是不一样的。
1）标准曲线的“0”孔，是标准曲线与坐标轴相交的点；操作上除加样时加试剂稀释液外，其余步骤和标准品完全一样；
2）空白孔（Blank）：有明确的规定为不参与酶促反应的孔，它是用来调整酶标仪的“0”点的。如果使用双波长检测的酶标仪，空白孔可以不设。
Q5：显示时出现满板黄？
A5：加显色剂前未洗板。
Q6：检测的OD值很低？
A6：可能的原因有：样本中检测蛋白的含量低；试剂盒效价低；忘记加终止液。
Q7：标准曲线线性不好？
A7：可能的原因：标准品稀释不准；加样不准；标准曲线的拟合方式有误。
Q8：一个依科赛96孔ELISA试剂盒可以分析多少个样本呢？
A8：一般地，一个依科赛96孔ELISA试剂盒可以做标准曲线、对照与40个样本（每个样本做一个重复）。
