MN NucleoBond Xtra 系列常见问题
Q：为什么抽到的 plasmid 量不如预期？？
A：由于 plasmid 量不如预期的原因非常多，以下为客户常见的问题
a. 请勿直接挑 single colon 至>40ml 的medium 进行培养
如果直接挑 single colony 至>40ml 的medium 中，常常会造成菌体过老而抽不到足够量的plasmid DNA，建议客户先将single colony 放入<5ml 的medium 中先培养6~8hr，再取1/1000 体积的菌液至新鲜的medium 中培养14~16hr (ex: 100ul cultured E.coli + 100ml LB medium)，这样的状态下得到E.coli 菌体生产情况较好，得到的plasmid 产量会较高。
b. 操作前一定要测菌体的 OD600 吸光值，确保E.coli lysis 效果
MN 建议high copy 的ODV=400, low copy 的ODV=800（ODV=OD600 xVolume），举例来说，如果OD600=2 的情况下，high copy 菌液量不可超过200ml，low copy 菌液量不可超过400ml。如果菌量超过MN 的建议，造成E.coli lysis 不完全，E.coli lysate 会堵住上方的filter，使得最后的plasmid 产量骤减。
c. 在 NucleoBond Xtra EF 包装中有一瓶标示为70% EtOH，这瓶必须请客户自行加入100%酒精，如果忘了加入EtOH，所有的plasmid DNA 会在wash 步骤中被洗掉。
d. 如果客户使用 Finalizer 进行plasmid 纯化，原厂建议是空压3 次以上将Finalizer 干燥，实验室测试时空压6 次干燥，如果finalizer 不够干，残留的EtOH 会影响后续的elute 效果。
建议客户可以观察 Finalizer 的尖端处，第一次空压时会有EtOH 附着在尖端处，经过几次空压后EtOH 会挥发，当尖端干燥时内部的membrane也会干燥。
Q： NucleoBond Xtra buffer 不够用了，该怎么办？？
A：建议客户另外购买 buffer set NucleoBond Xtra buffer set I (#740417) for NucleoBond Xtra，内含RES、LYS、NEU 各150ml，RNase A 10mg NucleoBond Xtra EF buffer set I (#740427) for NucleoBond Xtra EF，内含RES-EF、LYS-EF、RES-EF 各150ml，RNase A 10mg。
Q：NucleoBond Xtra 与NucleoBond Xtra EF 的差异为何？？
A：NucleoBond Xtra 与NucleoBond Xtra EF 所使用的column 不同，NucleoBond Xtra 的endotoxin 残留量为<1EU/ug，NucleoBond Xtra EF 的endotoxin 残留量为<0.05EU/ug。
由于这兩组 kit 使用的使用的column 不同，因此包装内的buffer 配方也不同，绝对不可以混用。
