SBI Exosome抽提试剂ExoQuick常见问题回答
2014-09-10
【SBI】Exosome抽提试剂——ExoQuick常见问题回答
Exosome抽提试剂
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货号
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产品描述
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规格
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样本类型
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EXOQ5A-1
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ExoQuick exosome precipitation solution
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75 reactions
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血清，生物体液等
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EXOQ20A-1
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100 reactions
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EXOQ5TM-1
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ExoQuick Plasma prep and Exosome precipitation kit
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75 reactions
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血浆
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EXOTC10A-1
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ExoQuick-TC for Tissue Culture Media and Urine
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10 reactions
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尿液，培养基上清等
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EXOTC50A-1
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50 reactions
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Exosome抽提辅助试剂
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货号
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产品描述
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规格
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说明
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TMEXO-1
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Thrombin Plasma prep for Exosome precipitation
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100 reactions
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凝血酶素D预处理血浆样本
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EXOLP5A-1
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ExoQuick‐LP Lipoprotein PreClear & Exosome Precipitation Kit
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5 reactions
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血清、血浆样本脂蛋白预处理试剂盒
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问:
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ExoQuick或ExoQuick-TC产品，我应该选择哪一款？
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答:
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ExoQuick试剂适合于富含exosomes的体液样本，如血清、血浆或者是腹水等；
ExoQuick-TC试剂适合于exosomes含量相对较少的体液，如细胞培养上清，尿液及脑脊液(CSF)等。
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问:
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在使用ExoQuick前，生物体液样本可以是冻存样本吗?
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答:
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冰冻的生物体液样本只能在冰上融解一次，并使用ExoQuick标准protocol操作。
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问:
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不同体液样本中exosome量、以及exosome蛋白和RNAs量是多少？
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答:
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不同样本的量各不相同，请参考以下表格：.
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体液
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样本体积
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颗粒数
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蛋白量
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RNA量
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血清/血浆
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250 ul
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6 x10^11
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10 mg
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250 ng
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尿液(一般)
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5 ml
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5 x10^9
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50 ug
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25 ng
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组织培养上清
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10 ml
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取决于培养的细胞种类，以及其分泌exosome的能力。
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问:
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使用ExoQuick处理样本后，得到了较多不溶解沉淀，难以进行下游实验，应该怎么办？
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答
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一般来说，这种情况会发生在血清或者血浆样本中。
在血浆样本中，包含许多纤维蛋白和纤维蛋白原，这些物质也可被ExoQuick沉淀下来。建议在使用Exoquick处理样本之前，按照操作说明书使用凝血活素D（Thromboplastin D）预处理样本。
在血清样本中，很有可能是ExoQuick处理血清后孵育时间过长，或者是离心时间过长，请参考以下建议：
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生物
体液
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预处理步骤
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选择的ExoQuick产品
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样本体积： ExoQuick体积
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孵育时间
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离心速度/时间
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血清
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无
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ExoQuick
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4:1 (v:v)
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30 minutes
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13,000rpm/2min
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血浆
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Thromboplastin D处理（请参考说明书）
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ExoQuick
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4:1 (v:v)
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30 minutes
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13,000rpm/2min
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问:
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如何重悬富集得到的exosome沉淀?
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答:
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这取决于exoosome下游实验，请参考以下建议：
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下游实验
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使用的Buffer
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Western Blotting
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RIPA buffer
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ExoELISA
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Exosome Binding Buffer
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提取RNA
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RNA提取试剂盒中的裂解Buffer
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Exosome运输研究
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无菌水，PBS，DMEM，或者其他培养基
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