细胞迁移/侵袭实验分析
——LumaScope活细胞成像系统
细胞迁移实验是普遍应用于评价损伤修复、贴壁肿瘤细胞转移或血管再生等的典型实验。划痕实验是实验室分析细胞迁移能力的常用方法。传统方法是应用无菌枪头（Tip）在细胞培养容器上划痕，并在不同时间点（通常间隔2h，持续24h）取出培养细胞于显微镜下观察记录细胞向划痕区域的迁移运动。此实验过程繁琐，且反复拿出细胞会影响细胞的生长条件，进而影响结果准确性。LumaScope活细胞成像系统具备传统显微镜的功能，可应用于细胞或组织培养实验室的日常细胞观察。如细胞状态实时检测、远程传送和监控、细胞计数、形态观察、染色观察等。LumaScope还可放置于培养箱中实现细胞的长时间的连续成像和定点监测。这种应用大大提高了实验过程检测的便捷性和结果的准确性。
本文将描述如何结合LumaScope与OrisTM迁移/侵袭试剂盒来实现细胞迁移/侵袭实验。实验结果可通过Image J软件来进行分析，最终得到细胞迁移的数量和速度数据。
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细胞迁移分析：
Day 1：am 9:00插入Stoppers，接种细胞；
pm 4:00（根据细胞贴附状况），拔除stoppers，PBS洗一遍后加入新鲜培养液。
Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化分析。
细胞侵袭分析：
Day 1：am 9:00包被薄层BME（用无血清培养液制备），插入stoppers，接种细胞；
pm 4:00 （根据细胞状况），拔除stoppers，包被厚层BME（含血清生长因子），再在第二层gel上面加上一层无血清培养液
Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化。
一、材料
OrisTM迁移/侵袭试剂盒
细胞、培养容器和培养液
CO2培养箱
LumaScope活细胞成像系统
Image J软件（含Mtracking插件）
二、操作方法
根据上述OrisTM迁移/侵袭试剂盒使用说明培养细胞；
75%乙醇消毒LumaScope系统及相关部件；
将LumaScope系统放入CO2培养箱中，并连接到控制电脑（建议使用10倍或20倍物镜）
将培养容器置于LumaScope载物台上，聚焦并找到目标视野；
设置Time Lapse程序（包括光源、成像参数和保存路径等），建议成像间隔时间为20-30min；
启动程序，系统将自动运行，直至结束；
实验结果可通过Image J软件进行分析。
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Lumascope成像系统于培养箱中成像
三、实验结果
LumaScope系统能够自动化获取并保存用户所设置的不同时间点的细胞照片。避免了反复开关培养箱来观察细胞的麻烦，并且能够保证整个成像过程环境条件的均一性。通过Image J的阈值和界限设置功能，计算圆形区域内的细胞数。
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四、结论
LumaScope活细胞成像系统是应用于活细胞成像研究的一款小巧、紧凑和智能的系统。OrisTM迁移/侵袭试剂盒能够在不同的细胞培养孔中形成精确大小的区域。利用LumaScope能够轻松获取不同时间点的细胞照片。LumaScope与Image J软件的联合应用是一种非常经济和便捷的分析细胞迁移/侵袭实验的方法。
LumaScope显微镜产品详细信息可浏览：
Etaluma公司网页http://etaluma.com/products/lumascope
吉泰公司网页http://www.genetimes.com.cn/product/inst.aspx
联系人：刘先生
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