细胞示踪、追踪和形态学分析——LumaScope活细胞成像系统
过去,研究者使用传统显微镜进行细胞示踪或形态分析,会面临种种困难和不便。首先,研究人员需要给细胞提供合适的培养环境以保持细胞在观察过程中的健康状态。在传统应用领域,通常通过在传统显微镜上加载活细胞培养系统来实现活细胞的连续观察。而这种活细胞观测系统价格非常昂贵。其次,如果实验室没有能够自动成像的显微镜,用户还需要在特定的时间点进行反复的开机、调焦、拍照、关闭光源等无聊的步骤。如果是过夜运行,此过程将更加繁琐。再次,就算是实验室平台有高级的自动化活细胞成像系统,用户也会经常面临使用时间受限及实验时间冲突等问题。
由美国Etaluma公司开发设计的LumaScope细胞成像系统,能够很好解决用户的上述困扰,轻松实现细胞示踪或形态学研究。通过结构优化,LumaScope紧凑的结构、多色自动化成像、抗高湿度环境等特性,使得它成为了实验室活细胞成像研究的利器。而且LumaScope平台式的载物台设计,可以兼容玻片、培养皿、培养瓶和多孔板等各种细胞培养容器。
一、材料与设备:
l 细胞、培养容器和培养基质;
l CO2培养箱
l LumaScope成像系统;
l Image J软件(带Mtracking插件);
二、实验程序:
1、 用75%乙醇对LumaScope主机及USB数据线进行清洁和消毒;
2、 将LumaScope主机放入CO2培养箱中,并通过USB线连接至控制电脑;
3、 将培养容器放在LumaScope载物台上;
4、 打开Lumaview软件,调节聚焦旋钮与载物台,找到目标区域;
5、 设置Time lapse成像功能参数(此类实验建议成像时间间隔为20~30min);
6、 启动Time lapse功能(此过程中用户不需要守在仪器旁边);
7、 程序自动结束,可在电脑上通过Image J软件来分析细胞示踪数据;
三、实验结果
LumaScope成像系统能够在用户所设定的时间节点进行自动化的成像并保存到控制的电脑上。使用Image J软件打开图像文件,生成一个新的图像栈(image stack)。利用Mtracking 功能逐个进行细胞示踪分析。
Mtracking分析中,需要输入的信息包括:A、细胞成像的时间间隔;B、像素大小。
最后,用户可轻松的获得单个细胞的示踪或形态数据。Mtracking还可生成单个细胞的相对excel数据。
四、结论
LumaScope系统是活细胞研究的绝佳利器。它独特的设计能够放入各种细胞培养箱并克服高温、高湿环境。此外,CO2培养箱比其他培养系统所提供的培养环境精度更高和稳定性更好。用户还可使用荧光标记分析目的蛋白表达或细胞分析,而不需要改变任何培养条件。LumaScope搭配Image J软件可轻松实现单个细胞的示踪或形态研究,而且在成本上比升级显微镜更为经济实惠。